کلونینگ اینترفرون لامبدا-۱ (اینترکولین-۲۹) انسانی از سلول های دندریتیک مشتق از مونوسیت و بیان آن در سلول هایhek۲۹۳t یوکاریوتی

نویسندگان

پریسا امیرکلوانق

parisa amir kalvangh dept of immunology, tarbiat modares university, faculty of medical sciences, tehran, iran1. گروه ایمنی شناسی، دانشکده پزشکی، دانشگاه تربیت مدرس، تهران، ایران معصومه ابتکار

massoumeh ebtekar dept of immunology, tarbiat modares university, faculty of medical sciences, tehran, iran1. گروه ایمنی شناسی، دانشکده پزشکی، دانشگاه تربیت مدرس، تهران، ایران کیهان آزاد منش

keyhan azadmanesh dept of virology, pasteur institute, iran2. گروه ویروس شناسی، انیستیتو پاستور، تهران، ایران کریستینه هارطونیان

christine hartoonian dept of pharmacology, tehran university, faculty of medical sciences, tehran, iran3. گروه بیوتکنولوژی، دانشکده پزشکی، دانشگاه تهران، تهران، ایران مهدی مهدوی

چکیده

زمینه و هدف: اینترفرون های نوع سه دارای سه لیگاند می باشند: ifn-λ1(il-29)، ifn-λ2(il-28a) و ifn-λ3(il-28b) که این سه لیگاند، گیرنده هترودایمر منحصر به فرد یکسانی را بکار می برند که از زنجیره های c‏rf2-12 (ifn-λ-r1/il-28ra) و crf2-4(il10-r-b) تشکیل یافته است. اینترفرون های لامبدا چندین خصوصیت از جمله فعالیت های ضد ویروسی، ضد تکثیری، ایمونومدولاتوری و فعالیت ضد توموری در in vivo را نشان می دهند. هدف این مطالعه کلون کردن ژن ifn-λ1 بدست آمده از سلول های دندریتیک و بررسی تولید پروتئین آن در حامل بیانی یوکاریوتی می باشد. مواد و روش ها: در این مطالعه آزمایشگاهی، rna تام از سلول های دندریتیک مشتق شده از مونوسیت تحریک شده با صد ng/ml از lpsاستخراج گردید. cdna از rna کل سنتز شد. سپس cdna مربوط به ifn-λ1 با پرایمرهای اختصاصی توسط pcr تکثیر و در داخل حامل ptz57r/tدر اشرشیاکلی سویه dh5α کلون شد. سپس با استفاده از اندونوکلئازهای محدودالاثر kpni و bamhi به داخل پلاسمید pcdna3.1+ ساب کلون شد. بعد از انتقال به hek293t، بیان پروتئین توسط روش elisa ساندویچی تایید شد. نتایج: توالی dna وارد شده مشابه با توالی کد کننده ifn-λ1 موجود در gene bank بود. ژن ifn-λ1 در سلول های ترانسفکت شده رونویسی و بیان آن در سلول های hek293t توسط الیزای ساندویچی تأئید گردید. نتیجه گیری: کلونینگ و بیان موفق ifn-λ1 می تواند نخستین گام برای تولید و تحقیقات بیشتر درباره فعالیت های این سایتوکاین و فراهم آوردن زمینه های تحقیقاتی برای کسب روش های درمانی جدید برای سرطان، عفونت های ویروسی، بیماری های خود ایمنی و آلرژی و طراحی واکسن های مؤثرتر بکار رود

برای دانلود باید عضویت طلایی داشته باشید

برای دانلود متن کامل این مقاله و بیش از 32 میلیون مقاله دیگر ابتدا ثبت نام کنید

اگر عضو سایت هستید لطفا وارد حساب کاربری خود شوید

منابع مشابه

ارزیابی قدرت سلول های دندریتیک مشتق شده از مونوسیت بیماران لوسمی مزمن در برداشت Tumor cell lysate با استفاده از تکنیک فلوسیتومتری

سابقه و هدف: سلولهای دندریتیک، کارآمدترین سلولهای عرضه کننده آنتی ژن به سیستم ایمنی می باشند. آنها قویا در شروع پاسخ اولیه ایمنی، بیماری های اتوایمیون، رد پیوند، عفونت با ویروس نقص ایمنی اکتسابی (HIV) و پاسخ ایمنی ضد تومور نقش دارند. سلولهای دندریتیک در شکل نابالغ خود مولکولهای آنتی ژن را به طور فعال برداشت می کنند. اگرچه توانایی سلولهای دندریتیک پالس شده با Tumor lysate در فعال سازی سلولهای T ...

متن کامل

تولید سلول های دندریتیک مهاری و سلول های شبه ماکروفاژی با استفاده ترکیبی از فاکتورهای بلوغ

Background and purpose: As professional antigen- presenting cells, dendritic cells are a bridge between innate and adaptive immunity by stimulating T lymphocytes. Recent research has demonstrated the extra ability of the myeloid cells plasticity into different cells in response to environmental stimuli. In the present study, the effect of using combination maturation factors (MCM, TNF-α, poly (...

متن کامل

تمایز سلول های بنیادی مزانشیمی مشتق از بافت چربی انسانی به سلول های غضروفی با استفاده از داربست هیدروژل فیبرینی

Background and purpose: Mesenchymal stem cells (MSCs) are the most widely used cell sources for cartilage tissue engineering. In the present study, human stem cells were used as a cell source. Scaffolds play an important role in tissue engineering, therefore, this study aimed at evaluating the ability of fibrin scaffolds in chondrogenic differentiation of adipose-derived mesenchymal stem cells ...

متن کامل

منابع من

با ذخیره ی این منبع در منابع من، دسترسی به آن را برای استفاده های بعدی آسان تر کنید


عنوان ژورنال:
مجله دانشگاه علوم پزشکی اراک

جلد ۱۴، شماره ۴، صفحات ۶۹-۷۸

میزبانی شده توسط پلتفرم ابری doprax.com

copyright © 2015-2023